大地爱好者在预计种植平菇的时间前50天左右，选择几株肉厚个大、无病虫害、成熟度较轻的平菇备用。 制作 母种培养基配方 麦粒培养基：将麦粒用温水浸泡20小时左右，煮沸15至20分钟左右，煮到麦粒不开花无硬芯时为止，捞出滤干，加1%左右生石灰拌匀，用罐头瓶装到3分之2的地方就可以了，不能装满。
双层牛皮纸加聚乙烯膜用橡皮筋封口。培养基灭菌用高压灭菌锅蒸2到3小时，灭菌锅气压归零后冷却备用。 具体步骤：先弄一只火炉，放一口小锅，锅里放水，锅上放一个筛子。到蒸汽散发时候，不伤手的情况下温度越高越好。在把接种室用喷雾器喷一次做降尘处理。等几分钟后，将备用好的菌株、刀片、镊子及已灭菌的培养基放在旁边，接种时候一定要在蒸汽上操作。
用灼烧灭菌的刀片切取1cm左右的的平菇内部组织放在备用的培养基上，立即封口，置于阴暗、通风、干燥处培养菌丝，保持20–25℃室温，1周后检查，查看气生菌情况。仔细查出有污染的菌瓶，经20天左右布满菌丝即可。冷藏备用。